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產(chǎn)品中心細胞生物學(xué)報告基因AC19L021/AC19L022雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介
李記生物Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣，無細胞內(nèi)源活性干擾等特點。
產(chǎn)品分類
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| 品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
|---|---|---|---|
| 分子式 | / | 純度 | / |
| 分子量 | / | 貨號 | AC19L021/AC19L022 |
| 規(guī)格 | 100T/10*100T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
螢火蟲熒光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin，在Luciferin 氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(Bioluminescence)。海腎熒光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide，在Coelenterazine 氧化的過程中也會發(fā)出生物熒光。生物熒光可以通過化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測定儀進行測定。
在 DLR 檢測中，螢火蟲（Firefly）熒光素酶和海腎（Renilla）熒光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。先是先以熒光素(Luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)，后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎熒光素酶(Renilla Luciferase)，并在后續(xù)加入海腎熒光素酶底物時，同時加入抑制螢火蟲熒光素酶催化Luciferin發(fā)光的物質(zhì)，使后續(xù)檢測僅僅檢測到海腎熒光素酶的活性，實現(xiàn)雙熒光素酶報告基因檢測。通過熒光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5' 啟動子區(qū)克隆在Luciferase 的上游，或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游等，構(gòu)建成報告基因(Reporter Gene)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)染細胞，用適當(dāng)藥物等處理細胞后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 Renilla Luciferase 相對更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除細胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣，無細胞內(nèi)源活性干擾等特點。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L021 | 100 T |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L022 | 10*00 T |
試劑盒組分
組份 | AC19L021（100T） | AC19L022（10*00T） |
A.5× Passive Luciferase Lysis Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
B.Firefly Luciferase Assay Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
C.D-Luciferin | 2 mg | 10*2 mg |
D.Renilla Luciferase Assay Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
E.50× Coelenterazine | 200 µL | 10*200 uL |
保存方法
藍冰運輸。-20℃保存，有效期12個月。
【注】：C組分建議預(yù)先使用B組分配制為2 mg/mL儲液，B組分、D組分及配制為儲液的C組分，根據(jù)實驗需求進行小批量分裝。所有檢測工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍融。
注意事項
1. 為取得最佳測定效果，在用單管的化學(xué)發(fā)光儀測定時，樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應(yīng)盡量控制一致；使用具有化學(xué)發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標(biāo)儀時，宜先把樣品全部加好，然后統(tǒng)一加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑。
2. 由于溫度對酶反應(yīng)有影響，所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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