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技術文章
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細胞培養中馬血清的作用有哪些
2020-06-19
馬血清采自健康馬血液為原料，封閉系統內無菌采血，微孔過濾而成，性狀為澄清液體，無噬菌體、超低內毒素，無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等，促細胞生長繁殖效果佳，適用于細胞、組織器官培養、細胞株保藏、單抗研制，是醫院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養基之一。細胞在單純的培養基中不能存活，在特殊類型的細胞培養中必須提供某些營養物質和生長因子才能是細胞得以生長并維持生長狀態。基礎培養基常常要添加血清，血清終濃度多為5－20％。特殊用途的血清來源需用經驗確定。廣泛應用的...
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說一說胎牛血清在細胞培養研究中的重要作用
2020-05-18
胎牛血清采用心臟封閉穿刺的方法采自孕6～8月孕齡的健康母牛腹中的胎牛。通過生物材料合成吸附技術和低溫進行前期處理，去除細菌、病毒、支原體、抗體等影響血清質量的因素，然后再在凈化車間中進行過濾分裝。胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。要說為什么很多細胞培養的科研人都用到胎牛血清，那就不得不說說胎牛血清那極為重要的作用。1.提供維持細...
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ELISA常見的組織樣本制備方法
2020-05-15
為了保證ELISA實驗數據的可靠性，在收集標本前都必須有一個完整的計劃。我們提倡新鮮樣品應盡早檢測，對收集后一周內檢測的樣本，及時儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集樣本，在取材后講標本及時分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰箱與室溫有一定溫差，蛋白容易降解，直接影響實驗質量，故應避免反復凍融。不同的樣本請根據實際情況處理。樣品制備方法1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再...
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血清中的沉淀物對細胞培養有什么影響？
2020-04-26
細胞生長，我們的試驗以及經驗表明沉淀物不會影響細胞培養，我們的客戶以及其它血清生產商也證明了這一點。過濾，如果血清中出現大量的沉淀物，血清將很難過濾。一般說來，因為在血清生產時后已經經過100nm或者40nm的過濾處理，并且經過了嚴格的無菌檢測，因此不推薦再過濾用于細胞培養的血清。在實驗室中沒有必要再過濾處理血清，在大規模的細胞培養中往往將血清直接加到培養基中一起過濾。污染，磷酸鈣往往被誤認為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會比較警覺的去...
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外泌體在胃癌發生發展中的作用與研究
2020-04-16
外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體*于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運...
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怎么處理牛血清白蛋白的常見問題
2020-03-25
牛血清白蛋白一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中，因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入牛血清白蛋白后，它可能起到保護或載體作用，不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對多數底物牛血清白蛋白而言，牛血清白蛋白可以使酶切更*，并可實現重復切割。在37℃，酶切反應超過1h時，牛血清白蛋白可以使酶更加穩定，因為在不含牛血清白蛋白的反應緩沖液中，許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限...
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蛋白酶K具有廣泛的底物特異性
2019-12-27
蛋白酶K具有廣泛的底物特異性。即便存在洗滌劑的情況下，其仍可降解許多非變性狀態的蛋白質。蛋白酶K分離自一種可在角質上生長的真菌白色側齒霉菌(Engyodontiumalbum)（前稱腐生真菌(Tritirachiumalbum)。因此，蛋白酶K能夠降解非變性狀態的角質（頭發），因而稱為“蛋白酶K”。1其切割的主要位點為帶有封閉氨基基團、鄰近脂族或芳香族氨基酸羧基端的肽鍵。因其廣泛的特異性，其較為常用。蛋白酶K（ProteinaseK），相對分子量約為29.3kDa,是一種切割...
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如何提取外泌體？都有哪些方法？
2019-11-26
外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載...
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